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常用菌种管理和保藏方法详解

  菌种需有专人保管,管理人员应具有较强的责任心,并具有一定的微生物专业知识和技术水平。菌种应保存在专用冰箱内,保存菌种的冰箱不得放置食品及易挥发性药品。按期有专人根据操作规程进行传代接种。下面转染试剂厂家的小编就来详细讲解一下。

  保存菌种应定期检查,一般每年检查1—2次,发现染菌变异等现象时,报告科室主任研究处理。菌种的来源、复壮、使用和鉴定等均应做好详细记录。试验菌种不得任意带出菌种保存实验室。外单位索取菌种时,应包装严密,妥善保存。

  菌种检查和复壮

  经过长期保藏和传代的菌种,由于种种原因易发生衰退、变异或死亡,因此各类菌种在保藏期间必须定期检查,发现变异或衰退,应及时给予恢复。

  1.定期检查

  在一定间隔时间需重新复活、分离、纯化、鉴定再保藏。

  检查项目:菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形态、生化特性及血清学检查。

  2. 防止菌落的衰退

  控制传代次数。

  创造适宜的培养条件。

  用不同类型的细胞进行传代。

  采用有效的保藏方法。

  菌种的传代

  将微生物接种至一新鲜培养基上/内,每萌发一次即为一代——USP

  菌种的传代次数(自原始的菌种冻干粉起)不得超过5代——GMP/CP2005

  菌种保藏

  菌种保藏方法一般分四个阶段

  (1)挑选特征典型的纯菌菌落

  (2)能产生孢子或芽孢的微生物应用孢子或芽孢进行保存

  (3)选择适宜的方法保藏

  (4)定期对保藏菌种进行检查

  常用的保藏方法

  琼脂斜面低温保藏法

  液体石蜡覆盖保藏法

  半固体琼脂保藏法

  甘油冷冻管保藏法

  保藏芽孢液

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