您的位置: 首页 > 公司新闻 >

DNAFect转染试剂使用的操作步骤及注意事项

  DNAFect是一种有效的阳离子脂质体转染试剂,适用于各种细胞的DNA转染。 大多数细胞系(包括原代细胞)具有高转染效率和非常低的细胞毒性。 转染试剂可用于瞬时转染,稳定转染,共转染,高通量DNA转染,基因表达和基因功能研究。

  注意事项

  1.转染试剂使用前应先震荡摇匀。

  2.转染效率与细胞密度有很大关系。 在不同实验之间应保持基本的传代步骤,以确保细胞在转染过程中不会过度生长或处于静止状态。

  通常,贴壁细胞转染的细胞密度为80-90%,悬浮细胞的细胞密度为3-5×10 5细胞/ ml。 转染的细胞密度是

  3.转染应基于不同的时间。 根据类型或用途,请勿在培养基中添加抗生素。否则会引起细胞死亡。

  操作步骤

  对于大多数细胞系,当DNA与DNAfect的比例为1:2至1:3时,转染效率较高。为了提高转化效率,表达水平并降低细胞毒性,当细胞密度为大。以下操作以24孔板各孔中细胞的DNA转染操作为例。的

  1.贴壁细胞:转化前一天,将500μl不含抗生素的生长培养基添加到24孔板的每个孔中,并在每个孔中接种0.5-2×105细悬浮细胞:在细胞中,等待细胞转染,当细胞长度达到24孔板的80-90%时,将转染添加到每排孔中。 500μl无抗生素生长培养基,每孔接种3-5×10 5个细胞。的

  2.在转染当天,先准备转染复合物,并为每个孔细胞准备以下剂量:

  一个。取适量的DNA,加入25μl无血清培养基,并轻轻混合。的

  b。取适量的DNAfect,加入25μl无血清培养基,轻轻混合,然后在室温下孵育5分钟。的

  C。孵育5分钟后,将稀释的DNA和稀释的DNAfect混合(以使DNA和DNAfectin的之后的总体积为50μl),轻轻混合,然后在室温下孵育20分钟(溶液可能看起来絮凝了)。形状,但不会影响转染效率)

  看完这篇文章,你对问题解决了吗?你有学到东西吗?如果你觉得这篇文章写的不错,欢迎关注我们的网站,我们会在网站里定期的更新一些新的知识,供大家浏览阅读。谢谢你对这篇文章的浏览阅读。