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Stable Cell Line Services

哺乳动物稳转株构建服务

稳转株广泛应用于重组蛋白和抗体生产、药物筛选、基因功能研究等方面。它们可以长时间且稳定携带基因修饰或表达的转基因。

GeneCopoeia提供高技术水平的稳转株构建服务,建立蛋白过表达、基因敲除或基因组编辑的稳转株,以满足您的具体研究需要。

 

基因过表达

ORF过表达稳转株构建

基因过表达是许多应用的重要环节,包括大规模抗体的产生,活细胞成像定位实验,以及蛋白结构功能研究。细菌中传统的过表达,由于错误折叠或翻译后修饰不当,往往使真核细胞蛋白无法溶解。因此,在生理相关的系统中表达真核蛋白是最理想的选择。

GeneCopoeia提供了稳定株构建服务,在你选择的细胞株中过表达任何感兴趣的基因。客户可以选择将自己的表达基因整合到基因组中,或者从GeneCopoeia53,000多个人类和32,000个小鼠ORF克隆基因库中选择需要的表达基因。

应用

  • 单克隆抗体生产
  • 用于生化分析的蛋白生产
  • 用于晶体或核磁共振结构测定的蛋白生产
  • 用于活细胞成像定位的蛋白融合标签
  • 用于pulldown/免疫共沉淀的蛋白融合标签
  • 药物靶点分析

优势

  • 最大的即用型、序列验证的ORF 克隆/慢病毒库,提供优质的产品,减少构建时间和繁琐的工序
  •  对于毒性基因可选诱导型启动子
  • 增加开放染色质位点整合的MAR(matrix attachment region)
  • Safe Harbor敲入ORF克隆
  • DHFR或GS基因筛选扩增系统

请联系我们4006-020-200或sales@igenebio.com

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基因干扰

shRNA稳转株构建

下调基因表达是基因功能研究的基础。在真核生物中,一直以来都难以进行基因的全敲除,于是研究人员使用RNA干扰(RNAi)技术,这种方法不改变染色体、无需考虑染色体结构以及靶位点的DNA甲基化状态,也能实现基因的转录后水平的下调。RNAi实现的“干扰”,会减少但不完全消除基因的表达。在基因表达完全消融会致死的情况下,或者仅希望下调基因的情况下,干扰可能比敲除更有利。与调控基因短暂性下调的siRNAs不同的是,shRNAs可以整合到基因组,从而稳定下调或条件性下调基因的表达。

GeneCopoeia提供预制/定制shRNA服务。

应用

  • 探究基因的功能
  • 探究通路中基因表达谱的信息
  • 药物靶点确定

优势

  • 最大的即用型、序列验证的shRNA 克隆/慢病毒库,提供优质的产品,减少构建时间和繁琐的工序
  • 对于毒性基因可选诱导型启动子

请联系我们4006-020-200或sales@igenebio.com

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基因组编辑

CRISPR稳转株构建

基因组编辑具有复杂生物体中对目标基因组位点进行特定改变的能力,在生物学和医学中具有重要作用。在过去,研究人员开发了与核酸酶复合的嵌合DNA结合蛋白,以产生特定基因组位点上的双链断裂,从而可以随意插入、删除和替换遗传信息。最近,CRISPR(Clustered, Regularly Interspersed, Short Palindromic Repeats)系统也作为基因组编辑工具。

除了基于CRISPR的质粒设计和构建服务外,Genecopoeia还提供稳转株构建服务,通过CRISPR产生特定的、有针对性的基因修饰。此外,CRISPR激活(CRISPRa)和CRISPR抑制(CRISPRi)分别能稳定地激活或抑制基因。我们还可以设计供体用于同源重组介导的基因编辑,转染目的细胞系,并分离出单个或双等位基因修饰的细胞克隆。

应用

  • 基因敲除
  • 引入点突变或自定义插入/删除
  • 将疾病突变纠正为野生型
  • 转基因定点插入到指定位点
  • 基因标记
  • 启动子或基因替换
  • 基因激活
  • 基因抑制

优势

  • GeneCopoeia拥有经验丰富的CRISPR的技术团队,可提供全套的基因编辑服务。

请联系我们4006-020-200或sales@igenebio.com

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细胞永生化

原代细胞经过一定数量的增殖,和一定次数的分裂后达到复制衰老的状态,从而限制了衰老或受损细胞的增殖。为了增加原代细胞在体外生长和分裂的代次,将永生化方法应用于原代细胞,显著延长了原代细胞的寿命。永生化细胞是研究细胞生物学、细胞代谢和分化的重要模型,可用于肿瘤生物学、免疫学、神经病学、血液学等领域的研究。

细胞永生化的方法

SV40T-使许多类型的原代细胞永生化最可靠和最简单的方法。将病毒基因SV40大T抗原导入原代细胞,通过灭活诱导细胞衰老的抑癌基因,从而改变细胞周期。

hTERT-细胞永生化最流行的方法之一。端粒酶逆转录酶(TERT)蛋白在大多数体细胞中不活跃,引起端粒长度随着年龄的增长而缩短,导致衰老。hTERT的表达阻止了端粒在细胞分裂过程中被截断,因此,细胞能够避免复制衰老。

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细胞株鉴定

细胞株鉴定和质控

研究人员认为,使用细胞株进行实验,需要很好地了解所用细胞株的纯度、种属来源、染色体和遗传特性。实验室培养细胞过程中容易受到微生物、支原体和其他细胞的污染,因此需要对其特性进行定期监测,以鉴定细胞株的身份。

Genecpoeia提供细胞株鉴定试剂和服务,检测重要的遗传标记,包括染色体、DNA指纹、选择性剪接和您感兴趣的基因,从而分析遗传变异探究转录谱确保培养无污染

请联系我们4006-020-200或sales@igenebio.com

分析遗传变异

Fluorescence in situ hybridization (FISH)检测

用于染色体计数,以及检测与疾病相关的基因突变、扩增和重排导致染色体上基因的物理排列发生大范围的变化。

染色体计数FISH可用于确定染色体拷贝数,用于癌症及其他疾病的诊断和预后。

疾病相关基因FISH可用于检测癌细胞中癌基因的缺失、扩增和重排。

ddPCR™

液滴数字PCR(Droplet Digital™ PCR, ddPCR)对检测基因组DNA的绝对定量以进行基因表达分析,可用于变异等位基因频率(variant allele frequency, VAF)的分析和NGS结果的验证。

STR分析

细胞间的交叉污染是一个普遍而持久的问题。短串联重复序列(Short Tandom Repeat, STR)DNA谱可分析STR标记的多态性,是一种相对简单、低成本、可靠的检测细胞交叉污染的方法。

MSI分析

微卫星不稳性(Microsatellite Instability, MSI)是由于未能纠正DNA复制过程中自发发生的错误,导致某些重复DNA基序的染色体突变积累为微卫星。对结肠和其他肿瘤组织标本进行MSI检测,可探究林奇综合症(Lynch syndrome)或遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer, HNPCC)的特征。

探究转录谱

RT-qPCR

用于选择性剪接体的定量和基因表达谱的分析。定制的qPCR引物设计用于mRNA的定量和外显子跳跃、内含子保留、5'或3'选择性剪接和其他剪接体的检测,以识别和量化不同的剪接体。

确保培养无污染

支原体检测

支原体污染在细胞培养过程中不易被发现,对细胞的生理和代谢会产生不利影响。因此,建议进行定期检测,以确保培养细胞的纯度。GeneCopoeia提供支原体检测服务和高灵敏的支原体检测试剂盒