EZShuttle™重组克隆体系

 -Efficient cloning system based on phage lambda recombination, the same principle as Gateway® technology.

产品介绍

GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同。EZShuttle™ 重组克隆体系主要包含以下产品:

1. EZRecombinase™ Mixes:催化 attL x attR 和 attB x attP 重组反应。

2. pEZ™ 表达载体: 主要用于构建即用型表达克隆。

3. EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆:GeneCopeia 提供约 35,000 种人和小鼠的 EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭      克隆。

EZShuttle™ 重组克隆体系与 Gateway® 克隆技术完全兼容,如表1所示。

 

表1. GeneCopoeia's EZShuttle™ 重组克隆体系(左列)与 Gateway® 克隆技术完全兼容。

 

产品优势

•   由重组酶、表达载体和已验证 ORF 序列的穿梭克隆组成的一个完整的重组克隆体系;

•   EZRecombinase™ LR Mix 的活性比 Gateway® LR Clonase™ 的活性高;

•  提供带有不同筛选标记和标签的 pEZ™ 表达载体,这些载体可用于基因克隆、基因编辑、蛋白质纯化和基因功能     分析;

 

产品应用

•   构建即用型表达克隆:使穿梭克隆或其它 DNA 片段插入到表达载体。

•   蛋白质纯化:使目的基因在一个或多个系统中表达,然后用于蛋白质纯化、形成结晶、抗体的制备、DNA 结合化验等。

•   启动子交换:克隆目的基因到带有不同启动子的载体。

•   启动子分析:利用报告基因测试不同启动子的功能,例如:荧光素酶。

•   基因标签:表达不带标签或带有不同融合标签的目的基因,例如: 6XHis、Flag®、GFP 等;可用于免疫共沉淀或亚细胞      定位等。

 

EZShuttle™ 重组克隆体系原理

GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同(图1)。

 

 

    图 1. E.coli 和 λ 噬菌体位点间的重组机制。

 

备注: Gateway® 是 Life Technologies 的注册商标。