• 易锦生物提供的所有人、小鼠和大鼠ORF 克隆及其慢病毒、AAV 颗粒与重组蛋白均使用基于毛细管电泳的 Sanger 法“金标准”全长测序,保证氨基酸序列与NCBI 数据库一致。
    All human and mice ORF clones and related Lentivirus, AAV particles and recombinant proteins provided by iGeneBio are fully sequenced using Sanger sequencing by capillary electrophoresis and Amino Acid Sequences are guaranteed to be matched with NCBI database.
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GLuc-ON™ 启动子报告克隆

产品简介

GLuc-ON™ 启动子报告克隆在GLuc报告基因上游插入一段1.2~1.5 kb的序列,这段插入序列与基因转录起始位点(TSS)上游大约1.5kb到下游200bp之间的5’侧翼序列一致,可以通过观察荧光素酶的活性来研究启动子对基因的调节作用。

GeneCopoeia可提供预制和定制的GLuc-ON™ 启动子克隆,包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以Gluc、mCherry或GFP作为启动子的报告基因;双报告基因载体系统以Gluc作为启动子报告基因,以分泌型碱性磷酸酶 (SEAP)作为信号标准化的内参,可在活细胞中对超过20,000种人和18,000种小鼠启动子进行实时活性分析。

Promoter reporter clones mechanism of action

图1. GLuc-ON™ 启动子报告克隆的双报告基因检测原理图。

优势

活细胞分析

  • 分泌型Gluc报告子
  • 无需裂解细胞
  • 节省样本,减少突变,简化试验流程(如脉冲追踪分析等)

实时研究

  • 可获得即时检测数据
  • 与实时活性分析过程类似

分泌型双报告系统

  • 分泌型Gluc和分泌型碱性磷酸酶
  • 对多样本常规转染进行精确比较

高通量兼容

  • 可用于信号通路研究
  • 可进行高通量研究

高灵敏度

  • GLuc比萤火虫或Renilla荧光素酶灵敏度高1000倍

使用方便

  • 所有启动子报告克隆均可直接用于细胞转染

Gaussia 荧光素酶

GLuc-ON™ 启动子克隆采用经过修饰的GLuc(mGLuc)作为报告基因,能产生强烈且稳定的荧光信号,克服了人野生型GLuc(wtGLuc)信号衰退快的缺点。

Signal stability of mGluc and wtGlucSignal stability of mGluc and wtGluc

图2. mGLuc (蓝色) 和 wtGLuc (红色)的信号稳定性比较。左侧:含有稳定剂的缓冲液;右侧:常规缓冲液。

双报告系统

GLuc-ON™ 启动子克隆可以将分泌型碱性磷酸酶(SEAP)作为第二个报告子和内参。这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。

图3. 不同启动子在H1B1B和HEK293T细胞中的活性分析。双报告系统启动子克隆和对照以两个重复转染进两种细胞中。转染24小时((HEK293T)和48小时(H1B1B)后分析样品。NEG(包含非启动子序列)和EMPTY(载体不含启动子)作为阴性对照。
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技术电话

020-32068595
4006020200

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