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转基因小鼠服务

介绍

GeneCopeia 提供原核显微注射法生成的带有 CRISPR 或 TALEN 介导的基因组修饰小鼠。我们能提供带有基因敲除、基因敲入或转基因等多种基因组修饰的小鼠模型,为您的基因研究、药物或疗法研究等工作提供强大的支持。

优势

  • 成功案例(图1)。
  • 通过CRISPR-Cas9技术及原核显微注射法快速构建小鼠品系(图2)。最快6个月即能获得F1代转基因小鼠。
  • 深入的项目咨询服务。
  • 专业的CRISPR克隆设计、构建及小鼠显微注射服务。
  • 可与GeneCopoeia GeneHero™ ROSA Safe Harbor敲入克隆配合使用。

 

成功案例:通过 GeneCopoeia CRISPR 转基因小鼠服务构建融合标签小鼠品系

图 1. 用GeneCopoeia CRISPR技术为小鼠的染色体基因加上GFP融合标签。将Cas9 mRNA、sgRNA及靶向M. musculus P2xr2 基因(NCBI gene ID: 231602)的供体质粒注射到单细胞阶段的小鼠胚胎中。CRISPR-Cas9介导未经编辑的染色体序列与同源供体之间发生同源重组,在目的基因的3‘转入GFP融合标签的基因。编辑阳性的founder小鼠通过PCR和测序方法进行确诊。图中灰色方块为P2xr2基因的外显子。

 

图2. 生成带有TALEN 或 CRISPR-Cas9 介导的基因组修饰的转基因小鼠模型。

 

参考文献:

1.Knockout mice by TALEN-mediated gene targeting.Nature Biotrchnology.2012,31,23-24

2.Generation of gene-modified mice via Cas9/RNA-mediated gene targeting.Cell Research.2013,23,720-723.

3.One-Step Generation of Mice Carrying Mutations in Multiple Genes by CRISPR/Cas-Mediated Geneme Engineeing.Cell 2013,153,1-9.

应用

GeneCopeia 为客户提供带有 CRISPR-Cas9 或 TALEN 介导的基因组修饰的小鼠。基因组修饰的类型包括组成型基因敲除、条件性基因敲除、组成型基因敲入、人源化及转基因等。

 

组成型基因敲除

我们可以通过在基因序列上诱导插入/缺失造成移码(无供体DNA)实现基因敲除,也可以通过诱导染色体与带有移码突变的供体DNA之间发生同源重组(HR)来实现基因敲除的效果。这段带有移码突变的供体DNA可以是一个带有筛选标记表达结构的质粒或者是一段寡聚核苷酸。通过以上两种方法构建的敲除小鼠所有细胞在任意发育阶段都带有目的的敲除突变,其敲除效果是永久性的,并且可以传代。

 

条件性基因敲除

我们可以在供体克隆的筛选标记表达结构及/或关键外显子序列两侧加上LoxP重组位点,通过同源重组将这段序列敲入基因组靶点来构建条件性敲除小鼠模型。这类小鼠模型与Cre 转基因小鼠交配后,所繁殖的后代小鼠体细胞内会启动Cre 介导的序列敲除,生成LoxP 重组位点之间的序列区被特异敲除的基因敲除小鼠。

 

 

组成型基因敲入

通过构建基因敲入小鼠模型,我们可以根据需要在小鼠的基因组靶点上引入点突变,或者将外源基因片段敲入特定的基因组位点模拟某种遗传疾病,或者通过报告基因或融合标签跟踪基因的表达。

 

人源化小鼠

人源化小鼠是指带有功能完整的人类基因、细胞或组织的小鼠模型。这些人类基因在小鼠基因组调控序列的控制下进行表达。人源化小鼠为人类疾病研究提供了一个强而有力的工具。

 

转基因小鼠 (ROSA26)

小鼠 ROSA26 位点是一个经过确证的“安全港(safe harbor)”位点。在 ROSA26 位点转入外源基因对小鼠的健康没有明显的不良影响,也能保证转入基因的稳定表达,因此这个位点是整合转基因片段的理想选择。我们可以为你构建转基因小鼠品系,在模型小鼠的 ROSA26 位点插入您的目标基因(及报告基因等)。

订购

GeneCopoeia 可根据您的实验需求构建转基因小鼠模型。这些 F1 代阳性小鼠基因组上带有您所需的基因敲除、敲入及转基因等基因组修饰。这些基因组修饰通过 TALEN 或 CRISPR-Cas9 技术介导生成,永久性存在于小鼠基因组序列并可以在品系中进行传代。除此以外,GeneCopoeia 还提供基因组编辑项目咨询服务。如需询价,请填写以下表格

 

 

服务内容

  • 3只(或更多)带 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介导的基因组修饰的 F1 代阳性小鼠
  • 服务报告

 

预计到货时间

  • TALEN 或 CRISPR-Cas9 介导的转基因小鼠:6-9 个月

 

 

相关服务

 

Genome-TALER™ TALEN 及 TALE-TF 客户定制服务 – GeneCopoeia提供TALENs,TALE-TFs和其他基于TALE的靶向基因组修饰因子的设计,构建和验证服务。服务层次选择丰富,价格合理。

GeneHero™ CRISPR-Cas9 产品及服务 – GeneCopoeia提供CRISPR-Cas9 sgRNA 设计及克隆服务,Cas9表达克隆和其他相关产品及服务,为客户实现简便快捷的靶向基因组编辑。

Genome-TALER™ 及 GeneHero™ 人类 AAVS1 safe harbor 基因敲入试剂盒 –  试剂盒能通过 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介导,将您的目的基因、筛选标记及其他遗传因子特异敲入人类第19号染色体上的 AAVS1 safe harbor 位点。我们有超过20,000条经过序列确证的人类ORF可用于构建 AAVS1 ORF 供体克隆。AAVS1 位点的安全整合能保证敲入基因被正常转录,并对细胞无已知的副作用。

Genome-TALER 及 GeneHero™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入试剂盒 –  试剂盒能通过TALEN或CRISPR-Cas9介导,将您的目的基因、筛选标记或其他遗传因子特异敲入小鼠基因组中的ROSA26 safe harbor 位点。这样的安全敲入能保证转入基因的转录活性,并对细胞无已知的副作用。