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慢病毒载体技术的介绍

  慢病毒载体是基于HIV-1病毒修饰的病毒载体系统,可以有效地将靶基因(或RNAi)引入动物和人的原代细胞和细胞系中。慢病毒载体基因组是一种正链RNA,入侵细胞后,它会通过独特的逆转录酶在细胞质中转化为DNA,形成DNA整合前复合体。入侵细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。整合的DNA转录mRNA,然后返回细胞质以表达目标蛋白;或产生RNAi干扰。

  慢病毒载体介导的基因表达或RNAi干扰作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。以上特性使慢病毒载体与其它病毒载体相比,比如不整合的腺病毒载体、整合率低的腺相关病毒载体、只整合分裂细胞的传统逆转录病毒载体,有鲜明的特色。大量文献研究表明,慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等,又很少引发机体免疫反应,能达到良好的基因治疗效果,具有广阔的应用前景。已成为国际上通用的转染系统之一,广泛用于各类实验室。

  应用

  将目的基因/RNAi转入难以转染的细胞,比如神经元细胞、干细胞;

  将目的基因/RNAi转入动物组织,以期获得长期表达;

  构建稳定表达目的蛋白/RNAi的细胞系,再用ex vivo的方法导入动物体内;

  基因治疗;转基因动物;基因敲除;

  药物研究:构建表达受体蛋白的细胞系,研究药物的作用;

  快速建立生产目的蛋白的细胞系,非常有前途的真核细胞表达方法。

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