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FuGENE6转染试剂的转染步骤

  FuGENE6转染试剂在转染前一天将细胞分成培养板,并且在转染当天细胞应达到50-80%汇合。将细胞接种在1-3×105/2 ml的6孔板中,孵育过夜以达到此密度。将FuGENE6转染试剂在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。

  1. 在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6,直至总体积到100 ul。

  2. 将3-6 ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液,轻弹管壁混合。

  3. 加入1-2 ug的DNA溶液(0.02-2.0 ug/ul),轻弹管壁混合。

  4. 室温孵育20分钟。

  5. 将6孔板中的旧营养液吸出,加入约1ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次,再加入2 ml不含血清和双抗的营养液。

  6. 将转染复合物加入细胞,混匀使之均匀分布。

  7. 3-8小时后,加入血清或换成含血清的营养液。

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