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我做了表达实验,但却没有目标蛋白的表达,为什么?

回答:一个带有启动子的正确的ORF DNA序列并不能保证相应的蛋白的表达。影响重组蛋白表达的因素很多:1)你选用的的表达载体是否与你的宿主相匹配,如pReceiver-M01是在哺乳动物细胞中表达的,而pReceiver-B01则是在细菌里表达的。2)如果表达的是一个膜蛋白,它是否需要在细胞内定位的靶序列。3)过量表达的蛋白对宿主是否存对表达宿主细胞有毒性作用?4) 该蛋白质是否正确折叠成有功能或者能适合免疫分析所需的三级结构?5)如果用一特异的单克隆抗体检测蛋白表达,最好做全长ORF的DNA测序以确定你是否得到一个不同的ORF剪接体。