—适用于Ion Torrent 二代测序平台的文库定量试剂盒
NGSquant™ Library qPCR Kit for Ion Torrent 是一套基于 qPCR 方法对 Ion Torrent 平台测序文库进行 DNA 分子数绝对定量分析的试剂盒。它可以对两端含有 Ion Torrent A、trP1 芯片序列的各种类型 DNA 片段文库进行高特异性的快速定量,检测结果灵敏度高,准确度高,重复性好,适用于大多数qPCR仪器。
产品优势
- 灵敏度高 —能检出低至 0.0083 pM 的文库样品;
- 特异性强 —使用抗体修饰法热启动 DNA 聚合酶,避免了 PCR 扩增前的非特异性结合;文库定量引物采用特殊算法设计,不会形成引物二聚体;
- 扩增范围广—能检测平均片段长度 1 kb 以内的文库;
- 扩增效率高(E>0.92),实验重复性好(R2 >0.99)。
本试剂盒包含以下四种成分:
• 文库DNA定量标准品(qPCR DNA standard for Ion Torrent):经过精确定量和严格质控的六份十倍比梯度稀释的双链DNA片段溶液(83 pM – 0.00083 pM),用于标准曲线制作;
• 文库定量引物(qPCR primer Mix for Ion Torrent):匹配Ion Torrent A和trP1芯片序列、并经过优化设计的一对qPCR引物;
• 2×qPCR预混液(2×qPCR Mix for Ion Torrent):含有经性能优化的热启动DNA聚合酶、qPCR反应缓冲液和SYBR Green染料等qPCR反应所需成分;
• ROX参比染料(ROX Reference Dye)。
图1.DNA标准品扩增曲线与熔解曲线。使用NGSquant™ Library qPCR Kit for Ion Torrent检测6个10倍梯度稀释的文库DNA定量标准品,每个标准品平行重复2次。结果显示,试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特性。
图2.DNA标准品扩增产物电泳图。使用NGSquant™ Library qPCR Kit for Ion Torrent扩增文库DNA标准品得到的qPCR产物,电泳显示条带均一,无非特异扩增现象。