嵌合抗原受体（CAR）-T 细胞在治疗恶性肿瘤方面显示出显著疗效。CAR-T 细胞疗法通过改造T细胞从而使其可以识别并有效地摧毁癌细胞来治疗癌症。标准方法是从患者体内采集 T 细胞，对其进行基因改造，然后将产生的 CAR-T 细胞注入患者体内以攻击其肿瘤。目前科学家们正在大力开发不同的 CAR 结构以扩大靶向癌症类型的范围并提高其抗肿瘤疗效。
CAR-T靶向荧光素酶报告稳转株可用于检测CAR-T疗效。研究CAR-T效应功能的其中一种方法是生物发光（BLI）报告试验，这种方法消除了⁵¹Cr释放和染料负载测定的担忧。在BLI报告基因测定中，将构成性表达荧光素酶的靶细胞与候选效应细胞共同培养，并通过BLI信号的损失来监测细胞毒性。除了易于使用外，BLI试验中表达荧光素酶的靶细胞可以提高实验间的可重复性。在细胞毒性和细胞活力检测中使用CAR-T靶向荧光素酶报告稳转株，实时监测候选 CAR-T 效应细胞的效力和疗效，从而实现免疫疗法的突破。
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Luciferase-labeled Raji Cancer Cell Line
Raji 株系由一名Burkitt’s淋巴瘤患者的肿瘤细胞建立。Raji 细胞组成性表达 B 细胞抗原 CD19、CD20 和 CD22，可用于评估癌症定向免疫疗法（如嵌合抗原受体 CAR-T 细胞）。
Raji荧光素酶报告稳转株由 Raji 野生型细胞系改造，可稳定表达萤光素酶（ firefly luciferase ），该稳转株细胞从外形上与野生型细胞无明显差异，在成瘤性方面，与野生型 Raji 细胞系趋势相近。经检测，该细胞系中可检测到高表达 Luciferase 活性。
Raji荧光素酶报告稳转株是靶向 CD19、CD20 或 CD22 的 CAR-T 或 NK 细胞的绝佳靶点。荧光素酶报告基因产生的信号与 Raji 细胞数量成正比，有助于量化其与 CAR-T 或 NK 细胞共培养时杀死 Raji 细胞的情况。
技术简介
Raji荧光素酶报告稳转株用于检测CAR-T疗效。Raji荧光素酶报告稳转株自然表达高水平的 CD19，可用作 CD19 CAR-T 细胞体外杀伤测定的靶癌细胞，预计也适用于 CD20 CAR-T 细胞。Zhang, D.K.Y.等使用表达 CD19 的 Raji-luc 细胞在 Burkitt’s 淋巴瘤的散播异种移植模型中对三种 CAR-T 细胞产品进行疗效测试。Raji-Luc细胞在体内的荧光强度水平反映了肿瘤细胞在动物体内的增殖和分布情况。
Ref. Zhang, D.K.Y., Adu-Berchie, K., Iyer, S. et al. Enhancing CAR-T cell functionality in a patient-specific manner. Nat Commun 14, 506 (2023).
