DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名称为脱氧核糖核酸酶I，是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I 水解单链或双链DNA后的产物，5’端为磷酸基团，3’端为羟基。DNase I 的活性依赖于Ca²⁺，并可被二价金属离子Mg²⁺、Mn²⁺等激活。在Mg²⁺存在的情况下，该酶可随机识别并切割双链DNA任意一条链上的任意位点；而在Mn²⁺存在的情况下，可识别并切割DNA两条链上几乎相同的位点，产生平末端或有1 – 2个核苷酸突出的粘末端DNA片段。

应用

• RNA提取
• 体外转录
• RT-PCR实验中DNA的去除
• DNase I 印迹
• 缺口平移
• DNA随机片段文库构建