EZShuttle™重组克隆体系
EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同。
Fast-Fusion™ Multi Seamless Cloning Kit
只需在条件(50℃) 下反应 5-60 分钟,任何 PCR 产物片段都能克隆到线性化载体上。经过简单纯化的 PCR 产物片段或者其他纯化的 DNA 片段能够与载体 DNA 末端的重叠序列融合连接(见图 1)。单个Fast-Fusion™ Multi 无缝克隆反应能够一次融合1~5个插入 DNA 片段。单个插入DNA片段能在5分钟内高效完成融合连接组装。预处理好的载体克隆阳性率几乎达到 100%。
Fast-Fusion™ Seamless Cloning Kit
Fast-Fusion™无缝克隆试剂盒为PCR产物克隆提供了一种快速有效的方法,只需在室温条件(25℃)下反应15分钟,任何PCR产物片段都能够克隆到线性化载体上。经过简单纯化的PCR产物片段或者其他纯化的DNA片段能够与载体DNA末端的重叠序列融合链接。
UltraHiPF® DNA Polymerase Kit
UltraHiPF® DNA Polymerase是一种耐热的超保真DNA聚合酶,具有5′-3’聚合酶活性和3′-5’外切酶活性,能够读取和扩增含有尿嘧啶和次黄嘌呤的模板,能够扩增富含GC或AT的模板,能扩增低至1个拷贝的基因组,不同种属来源DNA模板均能扩增超过12 kb的片段。使用UltraHiPF® DNA Polymerase 进行扩增,复杂的模板的扩增速度也能够达到15~30 sec/kb;多种模板在变性、退火和延伸皆为1sec的条件下,均能特异扩增2 kb产物。使用Sanger测序的方法进行检测,该酶突变率比Taq DNA聚合酶低55倍。使用该产品扩增得到的PCR产物为平滑末端。
2× UltraHiPF® PCR Mix
2× UltraHiPF® PCR Mix是一款基于UltraHiPF® DNA Polymerase预混型Mix。UltraHiPF® DNA Polymerase是一种耐热的超保真DNA聚合酶,具有5′-3’聚合酶活性和3′-5’外切酶活性,能够读取和扩增含有尿嘧啶和次黄嘌呤的模板,能够扩增富含GC或AT的模板,能扩增低拷贝数的基因组,不同种属来源DNA模板均能扩增超过12 kb的片段。使用UltraHiPF® DNA Polymerase 进行扩增,复杂的模板的扩增速度也能够达到15~30 sec/kb;多种模板在变性、退火和延伸皆为1sec的条件下,均能特异扩增2 kb产物。使用Sanger测序的方法进行检测,该酶突变率比Taq DNA聚合酶低55倍。使用该产品扩增得到的PCR产物为平滑末端。
NileHiFi® Long Amplicon PCR Kit
NileHiFi® Long Amplicon PCR Kit含有在常温下能够抑制其聚合酶活性的抗体,常温下或未热激活前可逆抑制聚合酶活性。聚合酶是具有3’-5’校正功能的热启动型高保真聚合酶,在本试剂盒优化的PCR Mix中可有效降低非特异性扩增。可扩增18kb人来源gDNA以及30kb λ噬菌体DNA为模板等大片段DNA,同时可扩增高GC%片段,适用范围广,实验过程中仅需添加引物与模板,操作简便。本产品中已包含反应所需的Polymerase、Mg2+、dNTP等,只需准备模板、引物及灭菌水,即可对靶点进行快速、特异地扩增。
Taq DNA Polymerase Kit
Taq DNA Polymerase是一个耐热的DNA聚合酶,具有5′-3’DNA聚合酶活性和对双链DNA特异的5′-3’外切核酸酶活性,无3′-5’外切酶活性。使用该产品扩增得到的PCR产物的3’末端附有一个“A”碱基,可直接用于TA克隆。
T4 DNA Ligase(T4 DNA连接酶)
T4 DNA连接酶催化相邻DNA或RNA链的5′-P末端和3′-OH末端形成磷酸二酯键的反应。本酶不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA连接,还可以修复双链DNA 、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口,但对单链DNA或RNA无连接作用。