常见问题(FAQs)

Genome editing products

基因组编辑产品   常见问题 我能用基因组编辑技术在基因组上引入一个点突变吗? 能:能。对于这种基因组编辑操作,您需要带有靶点同源重组臂以及所需点突变的供体 DNA。供体 DNA 可以是一个质粒或一条单链的寡聚核苷酸。供体 DNA 需要与基因组编辑工具(TALEN 或 CRISPR)进行共转染。基因组编辑工具在靶点生成的 DNA 双链断裂(DSB),细胞在存在供体 DNA 的情况下,会将供体 DNA 作为修复模板,利用同源重组(HR)机制修复 DSB。 ...

哪些表达载体适用于将感兴趣的ORFs通过ORFEXPRESS™ Gateway® 穿梭克隆转移到表达载体上?

回答:Invitrogen公司有一系列的pDEST表达载体(目标载体)和ORFEXPRESS™ 穿梭克隆相匹配,这些载体可以在细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等不同的宿主中表达各种类型  ...

GeneCopoeia提供其他物种的ORF克隆吗?

回答:我们目前提供已构建的人、小鼠ORF克隆。我们正要推出其他模式动物(如大鼠)的全长ORF克隆。如果您拥有感兴趣的模式动物基因的全长ORF序列,请提供给我们这些基因的基本信息(GenBank...

我做了表达实验,但却没有目标蛋白的表达,为什么?

回答:一个带有启动子的正确的ORF DNA序列并不能保证相应的蛋白的表达。影响重组蛋白表达的因素很多:1)你选用的的表达载体是否与你的宿主相匹配,如pReceiver-M01是在哺乳动物细胞中表达的,而pReceiver-B01则是在细菌里表达的。2)如果表达的是一个膜蛋白,它是否需要在细胞内定位的靶序列。3)过量表达的蛋白对宿主是否存对表达宿主细胞有毒性作用?4)...

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基因组编辑产品   常见问题 我能用基因组编辑技术在基因组上引入一个点突变吗? 能:能。对于这种基因组编辑操作,您需要带有靶点同源重组臂以及所需点突变的供体 DNA。供体 DNA 可以是一个质粒或一条单链的寡聚核苷酸。供体...

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在某些情况下,当比较你们的参照序列与NCBI上具有相同基因名称或描述的序列时,发现这两者间有一定程度上的差异。您如何解释这种矛盾?

回答:由于编码基因的多选择性剪接,以及从不同实验室关于ORFs、多态性或由于克隆复制出现冗余等的最新信息,一个基因座上的基因通常有多个转录产物。因此在选择基因全长的ORF克隆时,我们尽量选择每个基因座上最有代表性的转录本,这个转录本与同一基...

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什么是全长ORF克隆?

回答:一个全长ORF(开放阅读框)克隆是指一个插入有编码全长蛋白质的DNA片断的质粒。该插入DNA片断只含有编码一个全长蛋白质的序列(从起始密码到终止密码),而不包含有5′或3′端的非翻译区(UTRs)或内含子。...

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