快速有效地进行PCR产物克隆

Fast-Fusion™无缝克隆试剂盒为PCR产物克隆提供了一种快速有效的方法，只需在室温条件（25℃）下反应15分钟，任何PCR产物片段都能够克隆到线性化载体上。经过简单纯化的PCR产物片段或者其他纯化的DNA片段能够与载体DNA末端的重叠序列融合链接（见图1）。单个Fast-Fusion™无缝克隆反应能够一次融合1或2个插入DNA 片段。预处理好的载体克隆阳性率几乎达到100%。

利用本产品进行克隆连接无需限制性酶切位点，这项优势使得载体上的任何位点都可用于插入外源片段。线性化载体可通过PCR或者限制性酶切准备，PCR产物片段可通过Taq DNA聚合酶或其他高保真DNA聚合酶扩增获得。

产品优势

• 快速简单：1分钟操作时间，15分钟室温反应
• 通用性强：无需特定的限制性酶切位点或重组位点，PCR或酶切产物都可克隆
• 无缝克隆：不附加任何多余碱基序列
• 灵活多变：多至2个插入片段同时重组，多点突变易如反掌
• 高效率高通量：转化简单，阳性率高达90%以上.

实验步骤

Figure 1. 利用Fast-Fusion™ Cloning Kit将单个PCR片段插入线性化载体的流程图。