BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0

简介

GeneCopoeia推出的BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0是采用SYBR Green 染料法进行real-time PCR反应的专用试剂,用于目标基因快速、准确的定量检测。它含有热启动抗体修饰的Taq DNA聚合酶和优化的缓冲液,可避免低温下靶DNA的非特异性扩增,提高了Mix的性能。本产品是一种即用型的5×预混液,使用时只需加入模板、引物、灭菌水,即可对模板DNA进行快速、特异性的定量分析。

BlazeTaq SYBR® Green qPCR mix 2.0采用了新型抗体修饰的BlazeTaq™热启动DNA聚合酶,室温时酶的活性被抗体完全封闭,更有效地抑制非特异性扩增;反应时只需95°C预变性30 s即可使酶完全被激活,可明显地缩短qPCR反应时间。此外,优化的Buffer体系显著提高Real Time PCR反应的灵敏度和重复性,同时具有扩增效率高、特异性强、检测范围广的特点,并能有效抑制引物二聚体的产生,使实验结果更加可靠。

本产品提供了一种通用的反应条件及实验操作流程,且推出带有、或不带有ROX参比染料的两个版本供用户选择,适用于大多数荧光定量 PCR 仪。

产品优势

  • 灵敏度高:可检测低至5个拷贝数的DNA模板
  • 特异性强:抗体修饰热启动DNA聚合酶,更有效抑制引物二聚体以及非特异性扩增的产生
  • 扩增效率高:在宽广的GC含量范围内能维持高扩增效率
  • 操作简单:预先配好的5×预混液,反应前只需加入模板、引物、灭菌水
  • 适用性广:提供带有或不带有ROX的两个版本可选,适用于大多数荧光定量PCR仪

 

 

 

 

 

 

 

扩增曲线 标准曲线

 

图1. 使用BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0扩增8个10倍梯度稀释的双链DNA片段,DNA拷贝数范围为5×107~5个拷贝。如图所示,试剂盒显示出高灵敏度的特性,在宽广的定量范围内具有优异的线性相关性。

 


Comparison with competitor 竞品产品性能对比

使用Hela细胞系的梯度稀释的cDNA扩增B2M基因。BlazeTaq™(红色)与BioRad SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix(蓝色)的性能对比显示在相似扩增性能下,前者具有更强的信号。

 

Performance Comparison with competitor

 

BlazeTaq™(红色)与Powerup™ SYBR Green Master Mix(绿色)和Promega(蓝色)GoTaq® QPCR Master Mix(绿色)的性能对比显示,其灵敏度、扩增效率和特异性更高。

 

Ct value comparison with competitor

 

Ct值比较。 使用BlazeTaq™(蓝色),Applied Biosystems的PowerUp™ SYBR Green Master Mix(橙色)和来自Promega的GoTaq® qPCR Master Mix(灰色)扩增来自10 ng HeLa cDNA的41个基因。

 


 

 

使用BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0分别扩增50个和5个拷贝数的同一个DNA模板,并设无模板对照(NTC组),每组qPCR反应重复24次。结果显示,试剂盒对低浓度模板的扩增实验重复性好。

 


 

使用BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0分别扩增不同GC含量(GC含量范围在39.3~61.2%之间)的DNA模板。结果显示,各模板的扩增效率仍能维持在90%~110%之间,表明试剂盒对GC含量在一定范围内的DNA模板适用性广。