• 易锦生物提供的所有人、小鼠和大鼠ORF 克隆及其慢病毒、AAV 颗粒与重组蛋白均使用基于毛细管电泳的 Sanger 法“金标准”全长测序,保证氨基酸序列与NCBI 数据库一致。
    All human and mice ORF clones and related Lentivirus, AAV particles and recombinant proteins provided by iGeneBio are fully sequenced using Sanger sequencing by capillary electrophoresis and Amino Acid Sequences are guaranteed to be matched with NCBI database.
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CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系

IndelCheck™ CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系
包含靶点 PCR 试剂盒 (IC003)及 T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒(IC005)
IndelCheck™ CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系
包含靶点 PCR 试剂盒 (IC004)及 T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒(IC006)
靶点PCR 试剂盒(2.0版)
PCR 扩增基因组上的靶点序列,产物用于后续 T7 核酸内切酶 I 检测及靶点测序
靶点PCR 试剂盒(2.0版)
PCR 扩增基因组上的靶点序列,产物用于后续 T7 核酸内切酶 I 检测及靶点测序
T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒
使用 T7 核酸内切酶 I 剪切错配的PCR产物,以检测 CRISPR/TALEN 介导的插入缺失突变
T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒
使用 T7 核酸内切酶 I 剪切错配的PCR产物,以检测 CRISPR/TALEN 介导的插入缺失突变
SmartJoin™ 平末端靶点 PCR 克隆试剂盒
将平末端靶点 PCR 产物克隆到载体,以便进行测序确证
SmartJoin™ 平末端靶点 PCR 克隆试剂盒
将平末端靶点 PCR 产物克隆到载体,以便进行测序确证

IndelCheck™ CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系 IndelCheck™ CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系 靶点PCR 试剂盒(2.0版) 靶点PCR 试剂盒(2.0版) T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒 T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒 SmartJoin™ 平末端靶点 PCR 克隆试剂盒 SmartJoin™ 平末端靶点 PCR 克隆试剂盒

价格: ¥1,100.00 ¥3,400.00 ¥900.00 ¥2,600.00 ¥600.00 ¥1,800.00 ¥500.00 ¥2,100.00
货号:
  • IC001
  • IC002
  • IC003
  • IC004
  • IC005
  • IC006
  • IC007
  • IC008
规格: 50 个反应 200 个反应 50 个反应 200 个反应 50 个反应 200 个反应 20个反应 100个反应
数量:
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技术简介

GeneCopoeia 开发的 IndelCheck™ CRISPR/TALEN 插入缺失检测体系能为您的基因组编辑研究提供强大的助力。 IndelCheck 检测体系主要可用于以下两方面应用:

  • CRISPR sgRNA 或 TALEN 功能验证图 1) :在进行需时较长的基因组编辑项目之前(基因组编辑细胞株通常需时3-6个月,基因组编辑小鼠模型通常需时6-9个月),先进行功能验证预实验能排除剪切效率不佳的 CRISPR sgRNA 或 TALEN设计,节省大量实验时间。
  • 筛选基因敲除或敲入阳性的单克隆细胞株图 2)。

优势

  • 简化您的 CRISPR/TALEN 功能验证及基因敲除克隆筛选
  • 靶点序列 PCR 扩增能力强大,无需分离基因组
  • 优化过的 T7 核酸内切酶 I 检测系统,含阳性对照,易于上手

应用 1: CRISPR sgRNA/TALEN 功能验证

图 1. 使用IndelCheck™体系对 CRISPR 或 TALEN 进行功能验证。收集经 CRISPR 或 TALEN 转染的细胞,并针对靶点序列设计引物,使用靶点 PCR 试剂盒(1)扩增经过 CRISPR/TALEN 扩增的靶点序列。所得的 PCR 产物经解链退火生成杂交 DNA 双链产物,其中部分部分可能存在错配,可以被 T7 核酸内切酶 I 试剂盒(2)酶切检出。如果 CRISPR/TALEN 对基因组的编辑功能是阳性的,错配酶切所产生的条带可以通过电泳跑胶观察到。

应用 2: 筛选 CRISPR 或 TALEN 介导的基因组修饰

图 2. 使用 IndelCheck™ 体系筛选带有目的基因组修饰的单克隆细胞株。接种经 CRISPR 或 TALEN 转染的细胞并挑取单克隆细胞株,然后针对靶点序列设计引物,使用靶点 PCR 试剂盒(1)扩增经过 CRISPR/TALEN 扩增的靶点序列。左侧的流程用于筛选非同源末端连接(NHEJ)机制介导的基因敲除克隆,利用 T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒(2)对靶点 PCR 产物进行错配酶切,检测NHEJ机制引入的插入缺失突变;检测阳性的 PCR 产物通过靶点 PCR 克隆试剂盒(3)装载体送测,对引入的突变进行测序确证。右侧的流程用于鉴别基因敲除或基因敲入修饰,使用靶点 PCR 克隆试剂盒(3)将靶点 PCR 产物装载体送测,检测和确证靶点引入的基因组修饰。

以下图片是使用 IndelCheck™ 靶点 PCR 试剂盒及 T7 核酸内切酶 I 检测试剂盒进行的一个典型的功能验证实验的结果:

(A)
  M      –       +
(B)
 M      –        +

图 3. T7 核酸内切酶 I 酶切基因组PCR产物。该基因组经CRISPR-Cas9编辑。 对照细胞(-)的酶切产物应只有一条带,对应没有被切开的基因组PCR产物。转染了有活性的CRISPR-Cas9克隆的实验组(+),酶切产物跑胶出现3条带:1条来自未被编辑的细胞的基因组PCR产物,其余两条较短的条带为长度符合预期的错配酶切产物。

图 4. Smart-Join™ Blunt-end PCR Cloning Kit的性能比较。 将多组不同长度的PCR产物进行连接反应并转化涂板,然后检测菌落总数和阳性率。 显示SmartJoin™ Target Site PCR Cloning Kit(GeneCopoeia, Cat.No.IC007)的连接效率与Zero Blunt™ PCR Cloning Kit(Thermo Fisher, Cat.No.K275020)相当。

图 5. 多组Control Insert连接产物凝胶电泳图

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技术电话

020-32068595
4006020200

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