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细胞永生化试剂

原代细胞经过一定数量的增殖，和一定次数的分裂后达到复制衰老的状态，从而限制了衰老或受损细胞的增殖。GeneCopoeia提供细胞永生化试剂，利用重组慢病毒携带基因，如simian virus 40 (SV40)大T抗原和人端粒酶逆转录酶蛋白(hTERT)诱导永生化，可显著延长原代细胞的寿命。

 

购买 货号# 启动子 筛选标记 描述 价格（¥）
LPP-Sv40T–Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml SV40大T抗原 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Sv40T-Lv156-100 EF1a Puromycin ≥ 108 TU/ml SV40大T抗原 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Q0450-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml hTERT 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Q0450-Lv115-100 EF1a Hygromycin ≥ 108 TU/ml hTERT 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Q0450-Lv153-100 CMV N/A ≥ 108 TU/ml hTERT 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Q0450-Lv156-100 EF1a Puromycin ≥ 108 TU/ml hTERT 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-T1758-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml CDK4 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-T1371-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml HOXB8 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-P0078-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml HOXA9 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Z5789-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml HOXA10 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管)

1200

LPP-CMYC-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml c-Myc 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200
LPP-Mm01438-Lv105-100 CMV Puromycin ≥ 108 TU/ml Bmi1 纯化慢病毒颗粒，可直接用于转导实验, 100 µl (25 µl x 4管) 1200

 

 

GeneCopoeia Lentifect™ 纯化慢病毒生产经过标准的实验流程，使用高质量质粒DNA提取试剂盒、EndoFectin™ 转染试剂及TiterBoost™ 慢病毒滴度增强试剂。使用第三代自失活包装系统，符合2级生物安全等级的要求。

永生化慢病毒由CMV/EF1α启动永生化诱导基因的有效表达，并带有筛选抗性。

提供25ul*4管约108TU/ml的慢病毒。慢病毒进行干冰寄送，请收到后立即放到-80℃保存。避免反复冻融影响病毒滴度。

慢病毒表达结构经过全长测序、酶切、用基因特异性引物和载体特异性引物进行PCR大小验证。慢病毒产品无细菌、真菌及常见支原体污染。

 

细胞永生化实验操作

  • 原代细胞铺板，6孔板，0.5-2 x105/孔
  • 将冻存在-80℃的慢病毒取出，冰浴融化
  • 使用GFP慢病毒感染原代细胞，明确细胞MOI，以及明确细胞药物筛选最小致死浓度后，使用永生化慢病毒感染细胞。
  • 感染第二天，更换新鲜细胞培养液，继续培养。
  • 感染72小时后，更换带有筛选抗性的新鲜细胞培养液，继续培养。
  • 得到筛选抗性阳性细胞克隆后，即可进行永生化测试。