Luc-Pair ™ Duo-Luciferase HT Assay Kit (For High-Throughput)

– 适用于高通量分析的稳定型双荧光素酶检测试剂盒

产品介绍

The Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit是一款稳定的适用于高通量分析的双荧光素酶检测试剂盒,提供的试剂可直接用于培养基中的细胞,无需预处理或预裂解细胞,能够快速简便地检测萤火虫( Firefly luciferase ,FLuc)和海肾(Renilla luciferase ,Rluc)荧光素酶的活性。本试剂盒适用于 96 孔和 384 孔板进行细胞培养的大多数哺乳动物细胞培养基,适用于 GeneCopoeia 及 Promega 的萤火虫和海肾荧光素表达载体。

产品特点

稳定性高 — 本产品对萤火虫和海肾荧光素酶产生的光信号很稳定,半衰期可达2小时(见图1),很适合用于高通量分析。

简便快速 — 本产品已经优化用于多种培养基(见图2),无需预先进行细胞裂解,即可进行荧光素酶活性检测。

适用范围广 — 适用于多种不同的哺乳动物细胞系样品在微孔板(如 96-孔板,384-孔板)中检测。

背景值低 — 背景更低,数据更准确;

操作简便 — 海肾荧光素酶反应液包含了萤火虫荧光素酶的淬灭剂(见图3)终止萤火虫荧光素酶发光,同时启动海肾荧光素酶反应,只需两步实验;

重复性好 — 检测数据更可靠,且荧光素酶的浓度线性范围超过 9 个数量级。

 

图1. 使用GeneCopoeia 的 Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit检测萤火虫和海肾荧光素酶的活性。用Promega的pGL4.13和pGL4.75 报告载体转染HEK293细胞,转染48小时之后分别检测荧光信号,结果如上图显示。Fluc-GCI和Rluc-GCI分别代表GeneCopoeia品牌试剂盒检测Fluc和Rluc的结果,Fluc-Prmg和Rluc-Prmg分别代表Promega品牌试剂盒检测Fluc和Rluc的结果。

 

图2. 使用GeneCopoeia 的 Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit在不同培养基中检测萤火虫和海肾荧光素酶的活性。用Promega的pGL4.13和pGL4.75 报告载体转染HEK293细胞48小时之后,收集5×104 个细胞悬浮于无血清的DMEM,或者包含10%血清的DMEM, RPMI1640, EMEM, IMDM, McCoy’s5A, F-12K, MEBM, ACL-4, L15, Cho-S-SFMII, NCTC109。按照实验操作说明分别检测Fluc和Rluc的荧光信号,结果如上图显示。

 

   

图3. 萤火虫荧光素酶的活性被 Luc-HT Buffer II 淬灭。用Promega的pGL4.13和pGL4.75 报告载体转染HEK293细胞48小时之后,检测Fluc的荧光信号(左柱)。然后把不包含底物(中间柱)或包含底物(右柱)的1 x Luc Buffer II加入到测试孔,重新检测Fluc的荧光值,大约99.9%的萤火虫荧光素酶的荧光被淬灭。

 

 

载体

载体选择

GeneCopoeia 提供萤火虫荧光素酶(Firefly  luciferase)报告载体,可供广大研究者自由操作;只需将目的片段插入报告载体,即可应用荧光素酶检测试剂。 点击载体名称可查看载体图谱信息。

货号 载体 启动子 报告基因 示踪基因 筛选标记 抗性 载体类型
ZX001 pEZX-FR01 N/A* Firefly luciferase (hLuc) Renilla luciferase (Rluc) Puromycin Kanamycin Non-viral
ZX002 pEZX-FR02 SV40 Firefly luciferase (hLuc) Renilla luciferase (Rluc) N/A* Ampicillin Non-viral
ZX003 pEZX-FR03 miniCMV Firefly luciferase (hLuc) Renilla luciferase (Rluc) Puromycin Kanamycin Non-viral

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购买 货号 产品 描述 价格(¥)
LF013 Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit (10ml) 稳定型荧光素酶检测试剂盒,适用于高通量的萤火虫(FLuc)和海肾(Rluc)荧光素酶的活性检测。 1220
LF014 Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit (30ml) 3200
LF015 Luc-Pair™ Duo-Luciferase HT Assay Kit (100ml) 9000

   

 

购买 货号 产品 描述 价格(¥)
ZX001 pEZX-FR01 (10µg) pEZX-FR01 包含萤火虫荧光素酶(Fluc)和海肾荧光素酶(Rluc)的报告载体 3960
ZX002 pEZX-FR02 (10µg) pEZX-FR02 包含萤火虫荧光素酶(Fluc)和海肾荧光素酶(Rluc)的报告载体 3960
ZX003 pEZX-FR03 (10µg) pEZX-FR03 包含萤火虫荧光素酶(Fluc)和海肾荧光素酶(Rluc)的报告载体 3960