T4 RNA Ligase 1,即T4 RNA连接酶1，是一种ATP-依赖的可催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5′-P未端与3′-OH未端之间形成磷酸二酯键的酶。

T4 RNA Ligase 1可进行RNA之间的连接(效率最高)，单链DNA与单链RNA之间的连接(效率不高)，也可用于单链DNA之间的连接(效率很低)。在用于DNA和RNA之间的连接时，DNA提供5’磷酸基团，RNA提供3’羟基连接效率较高，而DNA提供3’羟基，RNA提供5’磷酸基团连接效率低。

T4 RNA Ligase 1不仅可以进行RNA分子间的连接，也可以进行RNA分子(最短8个碱基)的环化连接，还可以用于RNA和单核苷酸之间的连接，此时常用于RNA的3’末端标记。另外，还可以用于DNA的环化连接，例如5′ RACE中的cDNA环化。

应用

• ssRNA的分子间连接
• ssRNA与ssDNA的分子间连接
• miRNA文库构建中的5’端接头的连接
• RNA环化
• 5′-RACE中将寡核苷酸连接到单链cDNA中
• RNA 3’末端标记
• tRNA修饰
• 在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸