简介
技术简介
本试剂盒提供一整套试剂，用于小鼠基因型快速鉴定的DNA粗提和PCR扩增。试剂盒中的组织裂解液能够快速消化小鼠尾巴，耳朵或脚趾的组织，释放出的基因组DNA无需提纯即可用于PCR扩增。PCR产物用电泳观察便可对相应基因型进行快速鉴定。试剂盒的 PCR 反应体系适用于扩增长度 <1.5kb 的靶序列，同时生产平端及黏端的PCR产物，方便进行下游亚克隆及测序确证。实验流程快捷简便，结果准确度高，极大的节约了宝贵的实验时间和成本。
产品组分
| GeneCopoeia 小鼠基因分型试剂盒 |
| GeneCopoeia 小鼠基因分型试剂盒
（MG100，MG500） |
裂解小鼠组织，无需提取基因组即可直接进行PCR，对小鼠基因型进行鉴定。 |
- Tissue Lysis Buffer
- Proteinase
- 2×SuperHero PCR Mix
- ddH2O
*试剂盒不含PCR特异引物。 |
图1. 简明小鼠基因型鉴定流程。
资源
说明书
GeneCopoeia 小鼠基因分型试剂盒说明书
常见问题与解决
Q1. 样品和阳性对照均无扩增条带 。
A： 可能是PCR反应条件未设置好或者引物质量存在问题，请尝试优化PCR反应条件设置，并对引进行检查或重新设计。
Q2. 阳性对照正常，样品无扩增条带或扩增产量低 。
A1：样品未充分消化，释放的基因组DNA量不够。可尝试延长65℃消化时间至2h；
A2：蛋白酶K未完全灭活。 可尝试适当延长100℃加热的时间；
A3：PCR反应循环数不够。尽管35个循环一般已经能够扩增足够的产物，但对于某些片段，需要更高的循环数才能观察到较明显的扩增条带；
A4：扩增反应退火温度太高。可适当降低退火温度，建议使用梯度PCR仪进行优化；
A5：PCR引物不正确。请用提纯后的小鼠基因组DNA为模板作为阳性对照进行诊断 。
Q3. 存在非特异性扩增产物。
A1：在室温下配制PCR反应体系或配制结束后放置时间过久。请在4℃进行反应体系的配制，配制完成后请尽快进行PCR扩增；
A2：PCR退火温度太低，或循环数，引物浓度以及模板浓度太高。请对退火温度进行优化，并适当降低循环数，引物浓度或模板浓度；
A3：PCR引物错配。请核对引物序列并重新设计引物。
Q4. 阴性对照也出现扩增条带。
A： PCR反应体系引入了污染。请逐一检查组织裂解过程和PCR扩增过程的各个组分。
