– 高灵敏性双荧光素酶检测试剂盒
Luc-Pair™ Duo-Luciferase HS Assay Kit 是一款高灵敏性双荧光素酶检测试剂盒,可高效、快速检测萤火虫( Firefly luciferase ,FLuc)和海肾(Renilla luciferase ,Rluc)荧光素酶的活性。由于其具有极高的灵敏度, 可检测极低水平表达、调控和转染不佳的细胞的表达,也可搭配微孔板使用。适用于 GeneCopoeia 及 Promega 的萤火虫和海肾荧光素表达载体。本试剂盒是用于检测miRNA对靶基因抑制效率的理想工具。
产品特点
• 灵敏性高—本试剂盒对萤火虫和海肾荧光素酶产生的光信号极度敏感(见图1);
• 适用范围广—适用于多种不同的真核生物(脊椎动物、低等无脊椎动物)细胞系样品在微孔板(如 96孔板)或 单管中检测;
• 背景值低—背景更低,数据更准确;
• 操作简便—海肾荧光素酶反应液包含了萤火虫荧光素酶的淬灭剂(见图2);终止萤火虫荧光素酶发光,同时启动海肾荧 光素酶反应,只需2步实验;
• 重复性好—检测数据更可靠,且荧光素酶的浓度线性范围超过 9 个数量级;
• 兼容性强—与 Promega 的萤火虫和海肾荧光素表达载体相兼容。
图1. 用 GeneCopoeia 的 Luc-Pair™ 高灵敏性双荧光素酶检测试剂盒检测萤火虫和海肾荧光素酶的活性。用 Promega 的 pGL4.13 和 pGL4.75 报告载体转染 HEK293 细胞,转染 48 小时后分别检测荧光信号,效果如上图所示。Fluc-GeneCopoeia 和 Rluc-GeneCopoeia 代表 GeneCopoeia 的检测结果,Fluc-Promega 和 Rluc-Promega 代表 Promega 品牌试剂盒的检测结果。
图2. 萤火虫荧光素酶的活性被 Luc-H Buffer II 淬灭。用 Promega 的 pGL4.13 和 pGL4.75 报告载体转染 HEK293 细胞,转染 48 小时后先检测萤火虫荧光信号(左柱), 然后把 1 × Luc-H Buffer II【不包含(中柱)或包含(右柱)底物】加入到微孔板后,用光度计再测荧光值。实验结果表明约 99.9% 的萤火虫荧光素酶活性被淬灭(中柱), 而海肾荧光素酶反应不受影响(右柱)。