简介
SmartJoin™ Target Site PCR Cloning Kit是一套PCR平末端产物（或其他平末端片段）的高效克隆试剂盒。试剂盒载体Blunt-end linear vector含有解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)Barnase基因，其表达的小分子RNA酶Barnase可降解细胞中的RNA，具有强烈的毒性，因此它在特异细胞中的表达将造成细胞的死亡。使用本套试剂盒时，连接目的片段后的重组质粒将不表达Barnase，细胞可正常生长，未连接目的片段的Blunt-end linear vector自连后的质粒表达Barnase，将造成细胞的死亡。因此，理论上只有胞内含有正确连接目的片段的重组质粒才能正常生长，阳性率高，无需进行蓝白斑筛选，加速了克隆筛选的实验进程，操作简单方便。
产品优势
- 平末端DNA片段的连接效率高
- 有效消除自连产物，显著提高连接产物的阳性率
- 平末端PCR产物的连接无需要求额外的序列或限制性酶切位点
SmartJoin™ Target Site PCR Cloning Kit操作流程
图1. Smart-Join™ Blunt-end PCR Cloning Kit的性能对比。将多组不同长度的PCR产物进行连接反应并转化涂板，然后检测菌落总数和阳性率。 显示SmartJoin™ Target Site PCR Cloning Kit（GeneCopoeia, Cat.No.IC007）的连接效率与Zero Blunt™ PCR Cloning Kit（Thermo Fisher, Cat.No.K275020）相当。
图2. 多组Control Insert连接产物凝胶电泳图。
